? ? ? ?T細(xì)胞重定向的靶向腫瘤療法已經(jīng)改變了傳統(tǒng)腫瘤學(xué)的治療方式，但無論哪種方式的T細(xì)胞活化型療法（包括CAR-T，T-cell engager bispecific antibody等）都具有導(dǎo)致全身性細(xì)胞因子風(fēng)暴（cytokine release syndrome, CRS）的風(fēng)險(xiǎn)。由于引起系統(tǒng)性細(xì)胞因子釋放與T細(xì)胞活化型療法之間關(guān)系的分子機(jī)制尚不明確，目前有關(guān)T細(xì)胞激活型雙特異性抗體的研究中，如何尋找保持治療潛力和削減副作用的平衡點(diǎn)成為了一個(gè)重要的問題。 ? ? ? ?來自Genentech公司的研究人員在《SCIENCE TRANSLATIONAL MEDICINE》發(fā)表了名為CD3 bispecific antibody–induced cytokine release is dispensable for cytotoxic T cell activity. 的文章，該研究認(rèn)為，雙特異性抗體引起的細(xì)胞毒性T細(xì)胞的特異性腫瘤殺傷不需要依賴細(xì)胞因子釋放，因此在使用雙特異性抗體治療腫瘤的早期（或早于治療開始前）使用抑制細(xì)胞因子釋放的藥物（anti-TNFα）可以在不削減抗腫瘤能力的基礎(chǔ)上緩解或預(yù)防細(xì)胞因子風(fēng)暴的發(fā)生。該文章主要內(nèi)容如下： ? ? ? ?1.?Anti-HER2×CD3的雙特異性抗體引起的T細(xì)胞特異性腫瘤殺傷不需要細(xì)胞因子釋放 ? ? ? ?具有anti-CD3的雙特異性抗體，可以觸發(fā)多種T細(xì)胞亞群的激活，引起穿孔素、顆粒酶、細(xì)胞因子和趨化因子的釋放。全身性細(xì)胞因子的釋放一般是由單核和巨噬細(xì)胞引起的，被激活的T細(xì)胞在這里扮演觸發(fā)免疫級(jí)聯(lián)反應(yīng)的功能。 ? ? ? ?為了探究雙特異性抗體引起的特異性腫瘤細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子釋放的關(guān)系，研究人員使用了一種被證明可以在人源化轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)引起系統(tǒng)性細(xì)胞因子風(fēng)暴的Anti-HER2×CD3雙特異性抗體（TDB），在體外與PBMC和HER2陽性的腫瘤細(xì)胞（KPL-4）共培養(yǎng)，在培養(yǎng)的第7天將PBMC移入新的腫瘤細(xì)胞和TDB環(huán)境中，在共培養(yǎng)的第1天和第8天進(jìn)行細(xì)胞因子釋放檢測(cè)、T細(xì)胞活化檢測(cè)和靶細(xì)胞殺傷檢測(cè)（圖1）。結(jié)果表明，在共培養(yǎng)第1天時(shí)（第一次給藥后），TDB引起了腫瘤細(xì)胞凋亡和強(qiáng)烈的細(xì)胞因子釋放，包括IL-6、TNF-α、IFN-γ等。然而共培養(yǎng)第8天時(shí)（第二次給藥后），幾乎未檢測(cè)到PBMC釋放的細(xì)胞因子，但TDB仍然引起了腫瘤細(xì)胞的凋亡（在同等給藥劑量下，第二次給藥后TDB引起的腫瘤細(xì)胞凋亡甚至略強(qiáng)于第一次給藥后）。流式檢測(cè)的結(jié)果表明在TDB、PBMC、KPL-4共培養(yǎng)7天后，在PBMC中，T細(xì)胞激活的一個(gè)標(biāo)志物（PD-1）和效應(yīng)T細(xì)胞的標(biāo)志物（CD45RA）顯著增加。此結(jié)果顯示，第二次給藥后，細(xì)胞因子的釋放與T細(xì)胞激活及殺傷能力的表現(xiàn)不符，提示該HER2×CD3雙抗介導(dǎo)的T細(xì)胞特異性腫瘤細(xì)胞殺傷不需要細(xì)胞因子釋放。 圖1 anti-HER2×CD3 TDB誘導(dǎo)的T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性與細(xì)胞因子釋放表現(xiàn)相悖
? ? ? ?2.?預(yù)防性阻斷IL-6不會(huì)影響TDB介導(dǎo)的抗腫瘤療效 ? ? ? ?研究人員對(duì)TDB激活的PBMC進(jìn)行了單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析，發(fā)現(xiàn)TDB介導(dǎo)的細(xì)胞因子釋放（IL-6、IL-1β）主要來自單核和巨噬細(xì)胞。IL-6被認(rèn)為是引起CRS毒性的一種重要細(xì)胞因子，抗IL-6的抗體（tocilizumab）可有效治療CAR-T引起的嚴(yán)重細(xì)胞因子風(fēng)暴，但尚不清楚阻斷IL-6是否會(huì)干擾TDB的藥效。本文中的研究結(jié)果顯示，使用抗IL-6抗體在體外和體內(nèi)模型中均可抑制IL-6的釋放，不影響其他細(xì)胞因子（IFN-γ、TNF-α）的釋放?？笽L-6抗體不影響T細(xì)胞的激活和殺傷腫瘤細(xì)胞能力。與anti-IL-6抗體相比，傳統(tǒng)抗炎藥（地塞米松）可抑制除IL-6外其他細(xì)胞因子的釋放（包括IFN-γ和TNF-α），同時(shí)影響TDB介導(dǎo)的T細(xì)胞激活能力和腫瘤細(xì)胞殺傷。該數(shù)據(jù)初步提示對(duì)IL-6進(jìn)行早期干預(yù)是可行的而不會(huì)影響TDB的抗腫瘤活性。 圖2 特異性阻斷IL-6釋放不會(huì)影響TDB激活T細(xì)胞的能力和細(xì)胞毒性
3.?單核細(xì)胞衍生的系統(tǒng)性CRS受T細(xì)胞產(chǎn)生的TNF-α介導(dǎo)，并可通過阻斷TNF-α預(yù)防而不影響抗腫瘤藥效 ? ? ? ?為研究介導(dǎo)單核細(xì)胞釋放IL-6的上游信號(hào)通路，即TNF-α是否會(huì)引發(fā)單核細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子釋放，研究人員使用了CRISPR-Cas9敲除了人PBMC中的TNF-α，降低了PBMC中TNF-α陽性細(xì)胞的數(shù)量。使用TNF-α KO或WT型的PBMC與腫瘤細(xì)胞及TDB共培養(yǎng)，結(jié)果表明TNF-α的釋放是IL-6釋放所必需的，且敲除TNF-α不會(huì)影響TDB對(duì)腫瘤的殺傷能力和激活T細(xì)胞的能力。TDB激活的T細(xì)胞表達(dá)的TNF-α是單核細(xì)胞分泌IL-6分泌上游的最初來源，是介導(dǎo)IL-6分泌的主要原因之一。在人源化轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也表明，阻斷TNF-α?xí)瑫r(shí)阻斷IL-6和IL-1β的釋放，且不影響TDB本身的抗腫瘤活性。 圖3單核細(xì)胞釋放的IL-6受TDB激活的T細(xì)胞產(chǎn)生的TNF-α介導(dǎo)，并可通過阻斷TNF-α預(yù)防而不影響抗腫瘤藥效
? ? ? ?作者也承認(rèn)了研究中的一些局限性，如只使用了轉(zhuǎn)基因小鼠等嚙齒類動(dòng)物模型，以及只使用了一種針對(duì)實(shí)體瘤的雙特異性抗體等。 ? ? ? ?總之，該篇研究認(rèn)為，對(duì)于CD3雙特異性抗體二次給藥后，T細(xì)胞的反應(yīng)表現(xiàn)為不釋放細(xì)胞因子但是保留細(xì)胞毒性。作者認(rèn)為該實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以提示預(yù)防性的抗TNF-α抗體與T cell engager雙特異性抗體聯(lián)合用藥在預(yù)防細(xì)胞因子風(fēng)暴上的必要性。此結(jié)果對(duì)于如何降低雙特異性抗體引起的細(xì)胞因子風(fēng)暴具有一定的指導(dǎo)意義，相信隨著技術(shù)的發(fā)展和研究的深入，定能夠攻克雙特異性抗體在臨床應(yīng)用上的難關(guān)。
reference： Li, Ji et al. (2019) ‘CD3 bispecific antibody-induced cytokine release is dispensable for cytotoxic T cell activity’, Science Translational Medicine, 11(508), pp. 1–13. doi: 10.1126/scitranslmed.aax8861. |
